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DNA分子杂交原理


    DNA分子杂交 :DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分,旧能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。
    DNA分子杂交的意义 :分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DNA单链和小鼠DNA单链能形成杂交分子,而且只是部分碱基配对。但是,人与鼠之间的DNA 杂交分子的形成,比人与酵母之间DNA杂交分子的形成要容易。在生物进化过程中,DNA中的碱基序列也发生了变化。两种生物的DNA单链之间互补程度越高,通过分子杂交形成双螺旋片段的程度也就越高,二者的亲缘关系就越近;反之,亲缘关系就越远。所以,可以通过DNA分子杂交技术来鉴定物种之间亲缘关系的远近。

详解:要检测的核酸碱基序列 AGAGAGAGAGAGAGAG ATGCATGCATGC TCTCTCTCTCTCTCTC TACGTACGTACG

探针(已知,如HIV序列)TACGTACGTACG(荧光或是同位素标记)

将要检测的核酸水解,得到单链,与探针混合,若出现有核苷酸链与探针配对(荧光或是同位素标记显影),则被检测的核酸证实为已知序列。
其实说白了就是碱基互补原则的应用。