观察细胞分裂 乙醇盐酸起什么作用

1、选材：应选取有丝分裂旺盛的细胞，如植物根尖分生区的细胞。实验所选取的洋葱应避免选用新采收的样品，因为新采收的洋葱处于休眠状态，不易生根。2、取洋葱根尖材料时，应该在洋葱一天之中分裂最活跃的时间，一般在上午11点左右，如果因气温影响或不在上述时间做实验的话，可以在细胞有丝分裂最旺盛时取材，放人盛有固定液的培养皿中固定，即浸泡半天到一天，固定后用70％乙醇冲洗几次，再放入盛有70％乙醇的小广口瓶中保存。注意要等根尖长到1～5cm时才能切取，而切取的洋葱根尖长度是2～3mm,，这是因为，根据实验得知，根长到1～5cm时，根的长势最佳，此时细胞分裂最旺盛容易找到不同时期的分裂图像。此时可取生长健壮的根进行观察，切取洋葱根尖2—3cm,这个长度要从根的顶端(根冠)开始算起向上的距离，这个长度已将分生区包括了进来。若长度过长，在低倍镜下寻找分生区就会很困难。3、解离根尖培养好以后，装片制作是否成功，关键的步骤是解离。10％的盐酸溶液和95％的酒精溶液能溶解细胞壁之间的中层物质(胞间质)，使组织中的细胞相互分开。就是用要药液使组织的细胞相互分离开来，便于最后制片时能被压成一薄层进行显微观察。解离液中酒精的作用是迅速杀死细胞，固定细胞的分裂相；而盐酸的作用是使洋葱细胞的细胞壁软化，并使细胞间的中胶层物质溶解，从而达到分离细胞的目的。另外解离时间不宜过短，否则根尖未充分解离，压片时细胞分不开，细胞重叠；但又不能太长，否则使根尖过分酥软，无法进行漂洗和染色，且染色体成分被破坏。这一步是实验成功与否的关键，在室温下解离10一15min。解离时间要视室内温度而定，温度低，时间稍长，温度高，时间短。也可手拿镊子，轻轻按正在解离的根尖，感觉酥软即可。4、漂洗的目的是去除根中多余的解离液，特别是盐酸，因为染色时用的是碱性染料龙胆紫，酸与碱发生反应会影响染色效果5、染色时间亦不能过长，否则会使染色体与周围的其他结构均被着色，这样就无法形成颜色上的反差，不便于观察。 6、在制片时要用拇指按压盖玻片，目的是使细胞分散，不至于重叠。制片时也可以，一方面要用镊子把洋葱根尖弄碎，另一方面要压片，这样可以使细胞分散开来。压片时，在盖玻片上再加一片载玻片的目的，一是避免压碎和污染盖玻片。二是使压力均匀，从而使组织细胞均匀分散。同时用力必须恰当，过重时会将组织压烂，过轻则细胞未分散开，二者都将影响观察